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近日，高博诊断中心流式细胞实验室喻新建主任团队的研究成果在国际期刊CYTOMETRY PART B-CLINICAL CYTOMETRY上发表。该研究创新性地改良了组织流式细胞术，成功用于鉴定无骨髓及浆膜腔受累的复发/难治性B细胞恶性肿瘤患者的靶抗原，为无法获取液体标本的患者提供了全新的解决方案。
相较于传统的免疫组织化学检测耗时较长的局限，这项改良的组织FCM技术能够在4-6小时内快速完成检测，显著缩短了等待时间，为急需接受CAR-T细胞治疗的复发/难治性B细胞恶性肿瘤患者赢得了宝贵的治疗窗口。
研究内容与方法
1、研究方法
研究于2017年10月至2020年6月期间，共纳入68例无骨髓和浆膜腔侵犯的复发/难治性B细胞恶性肿瘤患者。通过细针或粗针穿刺获取新鲜肿瘤组织，并在CAR-T治疗前进行靶抗原鉴定。
技术核心在于组织标本的快速处理与细胞悬液制备：标本置于含2%胎牛血清的生理盐水中，迅速送至实验室。采用柔和的机械分离法替代酶消化法，以保留更多活细胞，最终制成适用于流式检测的细胞悬液。
检测使用标准抗体组合，涵盖CD10、CD19、CD20、CD22等关键靶点。抗原表达依据细胞比例明确界定，为临床选择CAR-T靶点提供定量依据。
2、研究结果
患者基线特征
在63例有效样本中，包含11例B-ALL和52例B-NHL患者，涉及弥漫大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤等多种亚型。所有患者均经历过多次治疗失败，凸显了快速准确鉴定靶点的临床紧迫性。
检测效能与抗原表达
细胞获取成功率高达92.6%，绝大多数标本可获得足够细胞进行流式分析。抗原表达数据显示，除1例既往接受过CD19 CAR-T治疗的患者外，其余62例均表达CD19；部分患者存在CD20或CD22不表达或低表达，提示靶点筛选的必要性。
与IHC检测的一致性对比
在与免疫组化结果的对比中，组织流式细胞术在CD19、CD20、CD22检测上与IHC的一致性分别达到93.3%、84.4%和88.9%。值得注意的是，FCM专一检测细胞膜抗原，避免了IHC因同时检测胞浆抗原可能造成的干扰，在指导CAR-T靶点选择上更具精准性。
研究意义与临床价值
1、精准靶点鉴定是CAR-T治疗成功的基石
CAR-T疗法的有效性直接取决于肿瘤细胞表面靶抗原的表达。尤其对于多线治疗失败、可能出现抗原丢失的患者，快速、准确的抗原鉴定是制定有效治疗策略的前提。
2、突破临床瓶颈，组织FCM提供快速解决方案
对于仅有实体瘤病灶、无法获取骨髓或胸腹水标本的患者，传统IHC检测耗时数天，可能延误治疗。本研究验证的改良组织FCM技术将检测时间缩短至数小时内，真正实现了“时间就是生命”的临床诉求。
3、技术可推广至更广泛的靶点与疗法
该方法不仅适用于CD19、CD20、CD22等B细胞靶点，未来还可拓展至CD79b、BCMA、CD7等其他靶抗原的检测，为相应的CAR-T疗法及抗体药物治疗提供通用的快速检测平台，具有广泛的临床应用前景。
总结而言，喻新建主任团队这项发表于国际权威期刊的研究，证实了改良组织流式细胞术是一种快速、准确、可靠的肿瘤靶抗原鉴定方法。它有效解决了无液体标本患者的临床检测难题，显著前置了治疗决策点，为复发/难治性B细胞恶性肿瘤患者及时接受CAR-T等精准免疫治疗提供了关键技术支撑。
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